Semakin besar berat molekul, semakin panjang gegelung dan semakin perlahan molekulnya. Jadi, elektroforesis + SDS berpisah berdasarkan berat molekul, bukan berdasarkan cas asli. Nota penting: Protein yang sama panjang biasanya tidak boleh dipisahkan oleh elektroforesis gel + SDS.
Bagaimanakah anda mengasingkan protein dengan berat molekul yang sama?
Pesentrifugasi, elektroforesis dan kromatografi ialah teknik yang paling biasa untuk menulen dan menganalisis protein. Sentrifugasi mengasingkan protein berdasarkan kadar pemendapannya, yang dipengaruhi oleh jisim dan bentuknya.
Teknik yang manakah mengasingkan protein berdasarkan cas?
Protein boleh diasingkan berdasarkan cas bersihnya dengan kromatografi pertukaran ion. Jika protein mempunyai cas positif bersih pada pH 7, ia biasanya akan terikat pada lajur manik yang mengandungi kumpulan karboksilat, manakala protein bercas negatif tidak (Rajah 4.4).
Manakah antara teknik berikut yang paling sesuai untuk mengasingkan protein berdasarkan berat molekul?
Kaedah kromatografi berdasarkan partition sangat berkesan pada pengasingan, dan pengenalpastian molekul kecil sebagai asid amino, karbohidrat dan asid lemak. Walau bagaimanapun, kromatografi pertalian (iaitu kromatografi pertukaran ion) adalah lebih berkesan dalam pengasingan makromolekul sebagai asid nukleik dan protein.
Jenis lajur yang manakahkromatografi mengasingkan protein berdasarkan berat molekul?
Kromatografi penapisan gel (GF) mengasingkan protein semata-mata berdasarkan saiz molekul. Pemisahan dicapai menggunakan matriks berliang yang mana molekul, atas sebab sterik, mempunyai darjah akses yang berbeza--iaitu, molekul yang lebih kecil mempunyai akses yang lebih besar dan molekul yang lebih besar dikecualikan daripada matriks.