Anda juga boleh nyahgaram sampel anda dengan ultraturasan hingga 1 persepuluh isipadu sebelumnya, yang mencairkan semula dan ulangi langkah UF. Kaedah terbaik untuk penyahgaraman ialah penyahgaraman melalui penapisan gel terhadap penimbal 50 mM, daripada penurasan ultra (klasik, bukan emparan).
Apakah penyahgaraman dalam penulenan protein?
Penyahgaraman digunakan untuk mengeluarkan garam daripada larutan protein, fenol atau nukleotida tidak digabungkan daripada asid nukleik atau reagen penghubung silang atau pelabelan berlebihan daripada protein terkonjugasi.
Bagaimanakah anda membersihkan protein?
Dalam penulenan protein pukal, langkah pertama yang biasa untuk mengasingkan protein ialah pemendakan dengan ammonium sulfat (NH4) 2SO4. Ini dilakukan dengan menambah jumlah ammonium sulfat yang semakin meningkat dan mengumpul pecahan berbeza protein termendak. Selepas itu, ammonium sulfat boleh dikeluarkan menggunakan dialisis.
Bagaimanakah anda menimbal pertukaran protein?
Pertukaran penimbal, walau bagaimanapun, dilakukan dengan pertama mengimbangi dengan resin lajur dengan penimbal yang sepatutnya dimasukkan ke dalam sampel. Dalam kedua-dua kes, konstituen penimbal yang membawa sampel ke dalam lajur akan digantikan dengan penyelesaian yang mana lajur itu dipra-seimbangkan.
Manakah antara teknik kromatografi berikut yang boleh digunakan untuk penyahgaraman protein?
Seperti yang dinyatakan di atas, penapisan gel boleh digunakan dengan berkesan untuk proteinpenyahgaraman dan dicapai dengan terlebih dahulu mengimbangkan lajur penapisan gel dengan air. Walau bagaimanapun, pertukaran penimbal dicapai dengan terlebih dahulu mengimbangkan resin lajur dengan penimbal sasaran.
