Pemuatan antibodi kawalan ialah kawalan penting kerana ia menunjukkan pemuatan sampel yang sama di semua telaga. Kawalan pemuatan juga menunjukkan pemindahan protein yang betul ke membran semasa proses western blotting. Kawalan pemuatan lazimnya ialah protein dengan ekspresi yang tinggi dan ada di mana-mana.
Apakah yang dilakukan oleh kawalan pemuatan?
Kawalan pemuatan ialah protein yang digunakan sebagai kawalan dalam percubaan Western blotting. … Ia digunakan untuk memastikan bahawa protein telah dimuatkan secara sama rata di semua telaga.
Mengapa kami menggunakan kawalan pemuatan dalam Western blot?
Kawalan pemuatan mempunyai peranan kedua sebagai kawalan dalam tompok barat. Ia boleh digunakan untuk memeriksa sama ada terdapat pemindahan sekata dari gel ke membran merentasi keseluruhan gel. Ini adalah penting apabila perbandingan dibuat bagi tahap ekspresi protein antara sampel.
Bagaimanakah anda menggunakan kawalan pemuatan dalam Western blot?
Isyarat daripada kawalan pemuatan biasanya digunakan untuk menormalkan isyarat daripada protein yang diminati. Untuk menggunakan kawalan pemuatan untuk tujuan ini, pengesanan dengan antibodi protein kawalan dan antibodi eksperimen harus dilakukan pada titik yang sama. Pelbagai protein berbeza digunakan sebagai kawalan pemuatan.
Mengapa actin digunakan sebagai kawalan pemuatan?
Beta-actin, biasanya digunakan sebagai kawalan pemuatan untuk Western Blot untuknormalkan tahap protein yang dikesan dengan mengesahkan bahawa pemuatan protein adalah sama merentas gel.
